农杆菌YEP琼脂（增菌）

储存条件：常温保存，3 年有效。

产品说明：

YEP 培养基（Yeast Extract Peptone Broth Medium）常用于农杆菌的增菌培养。酵母浸粉和蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠可维持均衡的渗透压。

成分组成：(g/L)

配制方法(仅供参考)：

1. 称取适量培养基，加蒸馏水至 1 L，搅拌均匀，调 pH 值至 7.0±0.2。

2. 121 ℃高温灭菌 15 min 或 115 ℃高温灭菌 20 min。

3. 固体培养基冷却到 50-60 ℃，加入抗生素，倾倒平皿，

4 ℃避光保存备用。

农杆菌感受态制备(仅供参考)：

1. 活化：将农杆菌菌种（-80 ℃）室温解冻，划线至 YEP平板上（50 mg/L Rif）28 ℃过夜活化。

2. 小摇：挑取单克隆接种于 5 mL 液体 YEP 培养基，28 ℃，200 rpm 培养过夜。

3. 大摇：取 2 mL 过夜菌液接种于 50 mL 液体 YEP 培养基中，28 ℃生长至 OD600约等于 0.5 左右。

4. 离心：采用 1.5 mL 离心管，4 ℃，4500 rpm 离心 10 min，弃上清，收集菌体。

5. 取现配的 0.1 mol/L 的 CaCl2溶液 400 μL 溶解上述菌块，冰上静置 30 min；

6. 再次离心，用 100 μL 的 CaCl2溶液溶解上述菌块，即为农杆菌感受态。

注意事项：

1. 注意无菌操作，避免微生物污染。

2. 根据菌株生长特性，可适当调整 pH 值。

3. 该培养基仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其它用途。

4. 称量时注意粉尘，佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。

5. 干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖，避免吸潮结块。未开封产品保质期三年，开封后根据存放条件的不同保质时间存在一定的差异。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！