血液基因组DNA快速提取试剂盒
储存条件:常温保存,保质期 1 年。
产品内容:

(一)红细胞裂解:
1. 不同样品处理方法
a. 哺乳动物: 血液使用量以 300μL 以下为宜,使用量越大产量越高,但产率会降低。如果血液多于300μL,重复步骤 2-3 两次可以提高 DNA 产量(即在步骤 3 沉淀中再次加入 300μL 的血液,并加入 0.5 mL裂解液 I,吹打混匀后离心弃上清)。
b. 禽类动物: 血液使用量以 20μL 以下为宜,可以从(二)DNA 提取步骤开始,直接加入 DNA 提取液。
2. 在 0.02-1 mL 新鲜或抗凝血液(冷冻血需先 37℃水浴融化)中加入 0.5 mL 裂解液 I(红细胞),充分吹打混匀。
注意:裂解液 I(红细胞)容易长菌,取用需要在无菌条件下进行,用完长期保存建议高压灭菌后保存。
3. 室温 12,000 rpm 离心 5 分钟,沉淀呈粉红色,小心吸弃上清。再短暂离心半分钟吸弃残留液体。
(二)DNA 提取:
1. 向有沉淀的离心管内加入 0.5 mL DNA 提取液(提取液有少量晶体沉淀,用前需 37℃水浴溶解),用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。充分吹打有助于提高 DNA 的得率。
2. 静置 2 分钟待溶液变清亮。
(三)基因组 DNA 收集:
1. 将步骤(二)所得清亮裂解液,转移到离心吸附柱中并静置 2-5 分钟后,12,000 rpm 离心半分钟,弃穿透液。
2. 在吸附柱中加入 500 μL 洗涤液,12,000 rpm 离心 1 min,弃穿透液。重复洗涤步骤一次。
3. 再将吸附柱 12,000 rpm 离心 30 s 以甩干乙醇。
4. 将吸附柱放入一个干净的 1.5 mL 离心管中。在吸附柱中央加入 50 μL 洗脱液(65-70℃预热),室温静置 2 min。12,000 rpm 离心 2 min。将穿透液重新加入吸附柱中央,12,000 rpm 离心 1 min 以洗脱更多基因组 DNA。
5. 检测 DNA 质量。将所得的基因组 DNA 保存于-20ºC 冰箱。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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