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蛋白凝胶银染试剂盒 LM86020SK

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蛋白凝胶银染试剂盒

储存条件:RT,保质期 1 年。

产品内容

2022040202380179322

产品说明:

本试剂盒采用高灵敏度的银染染料,可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色,具有目的条带清晰、背景低、操作时间可灵活控制的优点。另外,本试剂盒增加了一步短时敏化作用步骤,可明显降低背景及提升目的条带的亮度。

使用说明:(需自备无水乙醇、冰醋酸)

以下操作步骤中各溶液的用量以大小为 8.5×5.5 cm、厚度为 1.0 mm 的凝胶为例,以凝胶全部浸没到溶液为准,置于摇床上操作,一般用量 25 ml。对于大型凝胶,各溶液的配制量需按凝胶体积的比例放大。

注:实验前准备 50 ml 固定液(冰醋酸:乙醇:超纯水=1:4:6)、50 ml 洗脱液(10%乙醇)和 50 ml终止液(5%的冰醋酸)。

1.水洗:电泳完成后,用超纯水洗胶 2 次,每次洗涤 5 分钟。

2.固定:用 25 ml 固定液固定凝胶 2 次,每次固定 15 分钟。

3.洗脱:用洗脱液洗胶 2 次,每次洗涤 5 分钟。

4.水洗:用超纯水洗胶 2 次,每次洗涤 5 分钟。

5.增敏:将上一步洗好的凝胶置于增敏液中,室温下准确孵育 1 分钟后用超纯水洗胶 3 次,每次洗涤 20秒。增敏液的配制:取 A 液 125 μl 加入到 25 ml 超纯水中,混匀。

6.银染:弃去超纯水,将凝胶置于银染工作液中孵育 30 分钟。银染液的配制:取 B 液 250 μl、D 液 50 µl加超纯水至 25 ml,混匀。

7.水洗:用超纯水快速洗胶 2 次,每次洗涤准确控制为 20 秒。

8.显影:立即将洗好的凝胶浸没在显影液中,室温孵育 2-3 分钟,直至蛋白条带显示清晰。显影液的配制:取 C 液 5 ml、D 液 30 µl 加超纯水至 25 ml,混匀。

注意:显影 30 秒内,蛋白条带开始显现,继续显影至 2-3 分钟。若蛋白条带显色较浅,可适当延长显影时间至 5 分钟或以上。

9.终止:弃去显影液,将凝胶浸泡在终止液中反应 10 分钟。

注意事项:

1.提前准备固定液、洗脱液和终止液;实验前配制增敏液、银染液和显影液,现配现用。

2.操作时请使用超纯水和洁净的玻璃或塑料器皿,须戴一次性手套进行操作。

3.整个银染过程需在摇床上进行,摇床转速约 60 rpm 左右。

4.需自备乙醇、冰醋酸和超纯水。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

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