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保存方法及稳定性：4°C 运输，-20°C 保存，避免反复冻融。
产品介绍
2X WGA Master Mix 是一种即用型的全基因组 DNA 等温扩增试剂盒，其包含 dNTP，BSA，random primer，10xWGA Buffer 和能提高全基因组扩增的稳定性和扩增效率的添加剂。2xWGA Master Mix 以纯化的基因组 DNA 或者诸如全血，干血卡，毛囊和培养细胞的生物样本作为模板。客户只需加入变性模板， 2xWGA Master Mix，DNA polymerase 和 ddH2O 即可建立一个 WGA 反应体系。
试剂盒中的 DNA polymerase 是具有链置换活性和高聚合活性的聚合酶，其保证等温 DNA 扩增的高效性。当 DNA 聚合酶结合到变性的模板 DNA 上时，引发 DNA 等温扩增。DNA polymerase 3'–5' 核酸外切酶活性保证扩增过程中的高保真性。
采用WGA 技术客户无需抽提可以直接从生物样本中获得基因组 DNA。通过 WGA 技术获得基因组 DNA 包含全部的序列信息可以直接用于 PCR，Real time PCR 和 SNP 检测等。
标准操作-纯化基因组 DNA 等温扩增
按照下述方案准备充足的全基因组扩增反应需要的 DCST buffer。
注意：下表给出的 DCST buffer 的总量满足 16 个反应。配制好的 Buffer DCST 保存不应超过 3 个月。
| 组分 | 体积 |
| DTT, 1 mol/L | 5 µl |
| DCS buffer | 55 µl |
| 总体积 | To 60 µl |
1. 纯化的基因组DNA变性
a. 向 PCR 管中加入 2 μl PBS。
b. 向上述 PCR 管中加入 1 μl 基因组 DNA，基因组 DNA 浓度大于等于 10 ng/μl。
c. 然后向上述 PCR 管中加入 3.5 μl DCST buffer，充分吸打混匀。
d. 将上述样品置于冰上冰浴 10 min。
e. 向上述 PCR 管中加入 3.5 μl 预冷的 NTB buffer, 充分吸打混匀，然后立即将 PCR 管置于冰上。
2. 冰上解冻全部试剂然后短暂离心。
3. 按照下述方案准备反应混合物
| 2X WGA Master Mix | 12.5 µl |
| Denatured template | 总体积 |
| DNA Polymerase | 1 µl |
| Sterilized ddH2O | To 25 µl |
注意：为了防止变形的基因组 DNA 复性，请在冰上建立反应混合物。
4. 将含有反应混合物的PCR管置于离心机中短暂离心。
5. 将上述PCR管置于恒温水浴锅或者PCR仪中30°C 12~16 h。
6. 65°C 10 min使酶失活。
7. WGA产物如果进行PCR扩增，将WGA产物稀释20倍之后每个PCR反应体系中加入1 μl 稀释的产物。
标准操作-血样和细胞基因组 DNA 的扩增
按照上述的方案配制足量的 DCST buffer。
1. 血样和细胞的变性
a. 向 PCR 管中加入 2 μl PBS。
b. 向上述 PCR 管中加入 1 μl 血样或者细胞(≥600 cells/μl)。
c. 向上述 PCR 管中加入 3.5 μl DCST buffer，充分吸打混匀 。
d. 将上述 PCR 管置于冰上冰浴 10 min。
e. 向上述 PCR 管中加入 3.5 μl 预冷的 NTB buffer， 充分吸打混匀，然后立即置于冰上。
f. 冰上溶解试剂然后短暂离心。
2. 按照下述方案配制反应混合物
| 2xWGA Master Mix | 12.5 µl |
| Denatured template | 2.5 µl |
| DNA Polymerase | 1 µl |
| Sterilized ddH2O | To 25 µl |
注意：为了防止变性的 DNA 复性，请在冰上建立反应体系。
3. 将上述含有反应混合物的PCR管置于离心机中短暂离心。
4. 将上述PCR管置于恒温水浴锅或者PCR仪中30°C 4-12 h。
5. 65°C 10min使DNA Polymerase失活。
6. WGA产物如果进行PCR扩增，将WGA产物稀释20倍之后每个PCR反应体系中加入1 μl稀释的产物。
标准操作-毛囊基因组 DNA 扩增
按照上述的方案配制足量的 DCST buffer。
1. 毛囊细胞的变性
a. 向 PCR 管中加入 3 μl PBS。
b. 向上述 PCR 管中加入 1 根毛囊。
c. 向上述 PCR 管中加入 3.5 μl DCST buffer，充分吸打混匀。
d. 将上述 PCR 管置于冰上冰浴 10 min。
e. 向上述 PCR 管中加入 3.5 μl 预冷的 NTB buffer， 充分吸打混匀，然后立即置于冰上。
f. 冰上解冻试剂然后短暂离心。
2. 按照下述方案配制反应混合物
| 2xWGA Master Mix | 12.5 µl |
| Denatured template | 2.5 µl |
| DNA Polymerase | 1 µl |
| Sterilized ddH2O | To 25 µl |
注意：为了防止变性的 DNA 复性，请在冰上建立反应体系。
3. 将上述含有反应混合物的PCR管置于离心机中短暂离心。
4. 将上述PCR管置于恒温水浴锅或者PCR仪中30°C 12~16 h。
5. 65°C 10 min使DNA Polymerase失活。
6. WGA产物如果进行PCR扩增，将WGA产物稀释20倍之后每个PCR反应体系中加入1 μl 稀释的产物。