细胞学实验中必不可少的试剂就是平衡盐溶液,它可以保护细胞免受pH波动的影响,平衡细胞膜的渗透压。平衡盐溶液通常包括钠 (Na)、磷酸钠 (Na3PO4)、钾 (K)、钙 (Ca)、镁 (Mg) 和氯化物 (Cl)。K和Na调节渗透性和张力,而Mg和Ca保持细胞膜和内部结构的完整性。通过磷酸盐和碳酸氢盐,平衡盐溶液还能控制氢离子浓度,有些还包括葡萄糖等碳水化合物,可以为细胞提供能量。
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D-PBS、HBSS、EBSS是什么?
D-PBS
即Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline,杜氏磷酸缓冲盐溶液,是生物学、生物化学研究中使用较广泛的一种平衡盐溶液,DPBS和PBS成分是一样的,区别在于DPBS的Na2HPO4与KH2PO4的添加量略小于PBS。DPBS主要用于胚胎学方面的研究,可作为胚胎、组织、细胞的漂洗液、冻存液和培养液。可根据需要在D-PBS中加入葡萄糖、丙酮酸钠等,以维持培养物的基本营养。
HBSS
即Hank's Balanced Salt Solution,Hank's平衡盐溶液,是细胞分离或培养中常用的磷酸盐缓冲液之一,主要成分为NaCl,KCl,KH2PO4,Na2HPO4,NaHCO4和葡萄糖,具有维持渗透压、保持pH稳定、提供简单营养等作用,可用于体外实验中组织块、器官或细胞的漂洗、细胞或组织的运输、细胞培养用试剂的配制以及作为细胞计数的稀释液,也可用于细胞摄取、转运等实验。
EBSS
即Earle's Balanced Salt Solution,Earle's平衡盐溶液,是细胞分离或培养中常用的磷酸盐缓冲液之一。EBSS专为CO2环境中的细胞短期维持而设计,主要成分为葡萄糖,NaHCO3,NaCl,KCl和Na2HPO4,具有维持渗透压、保持pH稳定、提供简单营养等作用,可用于体外实验中组织块、器官或细胞的漂洗、细胞或组织的运输、细胞培养用试剂的配制以及作为细胞计数的稀释液,也可用于诱导细胞自噬等。
D-PBS、HBSS、EBSS的区别
Q:D-PBS与PBS的区别?
A:DPBS和PBS成分是一样的,区别在于DPBS的Na2HPO4与KH2PO4的添加量略小于PBS。DPBS主要用于胚胎学方面的研究,可作为胚胎、组织、细胞的漂洗液、冻存液和培养液。
Q:HBSS和PBS/DPBS有什么区别?
A:相比较而言,HBSS缓冲液中盐成分较PBS和DPBS更复杂,且有葡萄糖,可为细胞提供简单的营养,而PBS和DPBS中只有磷酸根,钠,钾,氯离子,只是最简单的盐平衡缓冲液,不能为细胞提供暂时的营养。
Q:EBSS和HBSS有什么区别?
A:HBSS和EBSS是多数培养基的基础溶液,两者的主要区别是缓冲能力不同。HBSS的NaHCO3含量较低(0.35克/升),其缓冲能力较弱,一般用空气平衡,即利用空气中的CO2使溶液pH值平衡。EBSS含有高浓度的NaHCO3(2.2克/升),其缓冲能力较强,溶液pH值需在5%的CO2培养箱中才能达到平衡。如果希望在CO2培养箱中保存组织,需要用EBSS。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织,用HBSS液就可以了。
平衡盐缓冲液的选择
酚红:PH指示剂,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,不加酚红。由于酚红干扰检测,一般在做流式细胞检测时,使用无酚红产品。
含有钙镁离子的缓冲液:通常用于作输送介质、试剂的制备
不含钙镁离子的缓冲液:通常用于细胞清洗