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Scolopendra subspinipes蜈蚣PCR鉴定试剂盒 LM899259a

Scolopendra subspinipes

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蜈蚣PCR鉴定试剂盒

Scolopendra subspinipes

 

产品及特点 

它具有下列特点: 

1. 即开即用,用户只需要提供DNA模板。

2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增蜈蚣,与其他病原没有交叉反应。

3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。

4. PCR mix 中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。

5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次,但只能用于科研。

规格及成分

编号

成分

规格

试剂一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(红盖)

试剂二

超纯水

1 mL(亮黄色)

试剂三

蜈蚣 PCR 引物混合液

100 μL(白盖)

试剂四

蜈蚣 PCR 阳性对照

1×10E8 拷贝/μL

50 μL(黄盖)

试剂五

使用手册

1 份

运输及保存 低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。

自备试剂 样品 DNA。 

使用方法 一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。

2. 如果有N个样品,则需要做N+2个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水(取决于试剂盒要求的样品起始量)中加 10μL蜈蚣 PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。 

二、设置 PCR 反应(40μL 体系) 

3. 对N+2个样品,在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照,故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分:

成份

N+2 个

样品管

PCR 阴性

对照

PCR 阳性

对照

PCR Magic Mix 3.0

各 20μL

20μL

20μL

蜈蚣

PCR 引物混合液

各2μL

2μL

2μL

N+2个样品

DNA模板

各18μL

--

--

PCR 阴性对照(水)

--

18μL

--

PCR 阳性对照(蜈蚣 PCR阳性对照1000倍稀释液)

--

--

18μL

4. 按下表设置 PCR 反应:

过程

温度

时间

预变性

95℃

5 min

PCR 反应

(35 个循环)

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

最后延伸

72℃

7 min

三、电泳检测 

5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实 验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

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