Rosetta-gami (DE3)pLysS 感受态细胞
基本信息
菌株类型: | E.coli |
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培养基: | LB培养基 |
生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
基因型: | Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F′[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10 trxB pLysSRARE (CamR, KanR, StrR, TetR) |
抗性: | 氯霉素,卡那,链霉素,四环素 |
质粒转化条件: | 42 ℃热激 |
应用: | 蛋白表达 |
诱导方法: | IPTG |
菌株特点
Rosetta-gami系列菌株来源于Origami系列宿主菌,该系列菌株的有点除了含有Origami菌株原有的TrxB和Gor基因突变提高含二硫键正确折叠 蛋白的高效表达,同时含有Rosetta系列菌株中含有的真核细胞稀有密码子。该菌株同时集合了Origami(DE3)和Rosetta(DE3)的优点。
Rosetta-gami(DE3)pLysS系列菌株含有pRARE质粒,能够提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个真核细胞中的稀有密码子tRNA,能够有效提升真核细胞蛋白的表达水平。pRARE质粒具有氯霉素抗性。
Rosetta-gami(DE3)pLysS感受态细胞同时具有氯霉素,卡那,链霉素和四环素四种抗生素抗性。
Rosetta-gami(DE3)pLysS被建议使用于含有Bla标记的氨苄抗性表达质粒。当使用pCDF系列载体时,还需要使用壮观霉素(Spectinomycin)进行筛选。菌株中 的rpsL突变使得该菌株具有链霉素抗性
DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
含有pLSs质粒,pLySs质粒能够产生T7溶菌酶,可以有效降低目的基因的基础表达水平。pLySs质粒使得该菌株具有氯霉素抗性。pLySs质粒的起始复制位点是p15 Origin, 这使得该质粒能够和pUC-及pBR322-衍生的质粒互相共存。
亮氨酸生长缺陷型菌株。
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