酵母蛋白提取试剂盒（变性）

保存：RT，未开封有效期 24 个月。

包装内容：

产品简介：

本产品通过使用玻璃珠震荡法，结合化学裂解法破碎酵母细胞壁，适用于多种酵母菌的培养物（包括菌液或平板菌落）。提取的酵母总蛋白可用于 SDS-PAGE 凝胶电泳及免疫印迹（Western Blot）实验。本产品提取蛋白为变性蛋白，不能用于蛋白活性检测等相关实验。

使用方法：

准备步骤：

将提取液成分 II 全部加到提取液成分 I 中，充分混匀作为提取液备用，未用部分-20 ℃冻存。

操作步骤：

1. 5,000 rmp，4 ℃离心 5 min 收集酵母菌液细胞沉淀（酵母菌液 OD 值 0.5-2.0）。

2. 加入 1 mL 洗涤液震荡混匀，5,000 rmp，4 ℃离心 5 min 沉淀酵母细胞，弃上清。

3. 用 100 μL 提取液悬浮酵母细胞，并快速转移到 1.5 mL 离心管中，95-100 ℃金属浴或水浴 3 min。

4. 加入 0.2 g 玻璃珠，旋涡震荡器上剧烈震荡 5-10 min。

5. 用移液器或者巴斯德吸管回收提取液。

6. 剩余玻璃珠的离心管中再次加入 100 μL 提取液，稍加震荡，再次回收提取液。

7. 合并两次提取液即为酵母总蛋白样品。

8. （可选步骤）12,000 rmp，4 ℃离心 15 min，上清含可溶性蛋白质，沉淀含不溶性蛋白质。

9. 总蛋白样品于 95-100 ℃金属浴或水浴 1 min，可直接用于 SDS-PAGE 电泳（无需添加 Loading buffer）。

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途！