活细菌/死细菌双染试剂盒
产品简介:
活细菌/死细菌染色试剂盒是采用 N01/PI 绿色-红色荧光探针双染细菌的方法染色活细菌和死细菌。
细菌细胞活性取决于其代谢特征或膜完整性。但是依赖于代谢特征的检测方法通常只适用于部分细胞类型。评估细胞膜完整性的方法具有更高的灵敏度和更普遍的适用性。
活细菌/死细菌染色试剂盒利用细菌细胞膜的完整性差异,可以可靠地进行染色并在几分钟内定量区分活细菌和死细菌。
本试剂盒中的 N01 活细菌染色探针为绿色荧光标记的活细菌探针,能透过活细菌的完整结构的质膜, 具有 500 / 525nm 的最大激发/发射波长。膜受损的死细菌染色探针为 PI,是一种红色荧光核酸染色剂, 只能穿透膜受损的死细菌。具有完整细胞膜的细菌将被荧光染料染成明亮的绿色,而膜受损的细菌表现出较少的绿色荧光,会发出较强的红色荧光。
当膜通透性的绿色荧光探针 N01 进入细菌后,跟细菌的核酸结合。染色探针 N01 在进入细胞膜之前荧光较弱,当与活细菌的 DNA 结合后其荧光强度大大增强,被激发后可以发出绿色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。单独使用 N01 染料时可以染色所有细菌,包括膜结构完整的细菌和膜受损的细菌。
红色核染色染 PI 不能穿过活细菌的完整细胞膜,它仅穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞,并嵌入细胞的 DNA 双螺旋从而产生红色荧光(激发:488,545nm,发射:617 nm),因此 PI 仅对膜受损的死细胞染色。
根据以上特点, N01 和 PI 可以被结合用来作为活细菌和死细菌的双重染色。由于 N01-DNA 和 PI- DNA 都可被 488 nm 激发,因此可用荧光显微镜同时观察活细胞和死细胞。