INVSc1感受态细胞
产品储存:-80 ℃保存,6 个月有效。
产品组成
基因型:
MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52
产品说明:
INVSc1 菌株是专门用来做重组蛋白表达的宿主酵母,pYES2 质粒与 INVSc1 酵母配套使用,激活pYES2 质粒的 GAL1 启动子的转录进而启动下游重组蛋白的表达。INVSc1 为合子型,可直接通过 PEG/LiAc将pYES2质粒转化进入INVSc1细胞内。质粒pYES2的筛选标志为URA,可用SD-URA板进行筛选。INVSc1感受态细胞经特殊工艺制作,-80℃可保存六个月,pYES2 质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。
使用方法:
1. 取 100 µl 冰上融化的 INVSc1 感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒 2-5 µg,Carrier DNA (95-100℃,5min,快速冰浴,重复一次) 10 µl,PEG/LiAc 500 µl 并吸打几次混匀,30℃水浴 30 min (15 min 时翻转 6-8次混匀)。
2. 将管放 42℃水浴 15 min (7.5 min 时翻转 6-8 次混匀)。
3. 5000 rpm 离心 40 s 弃上清,ddH2O 400 µl 重悬,离心 30s 弃上清
4. ddH2O 50 µl 重悬,涂质粒筛选用:SD-U medium 板,29℃培养 48-96 h。
1. 筛选培养基可选本公司 SD 系列产品,
注意事项:
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3. INVSc1 酵母菌株对高温敏感,最适生长温度为 27-30℃;高于 31℃,生长速度和转化效率呈指数下降。
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。严禁用于临床医疗及其他非科研用途!